Het Type Witte Kristallijne HEPES van CAS No 7365-45-9 AR Bufferoplossing

Voorbereiding en toepassing van 2 - (4 - (2-hydroxyethyl) piperazin-1) ethanesulfonic zure buffer

Tijdens celcultuur, is HEPES vaak onontbeerlijk. In open cultuurvoorwaarden, als HEPES wordt toegevoegd, kan het de verhoging verhinderen van pH oxydatie van het cultuurmiddel, om pH te handhaven bij ongeveer 7,0, effectief de buffercapaciteit van het middel van de viruscultuur te verbeteren, een geschikt milieu verstrekken voor het virus, en de stabiliteit van virusdeeltjes bevorderen. Bovendien kan het de structuur en de functie van het enzym bij lage temperatuur beter handhaven. Hoe ongeveer de voorbereiding en het gebruik van HEPES-buffer? Geef u een korte inleiding.

Verschillende literatures hebben verschillende adviezen over de voorbereiding van de bufferoplossing van HEPES. Volgens het gebruik, is men zuiver HEPES + NaOH, is andere HEPES + zout. Diverse voorbereidingsmethodes worden samengevat als volgt:

1, Voorbereiding van 500 ml 1 m HEPES, pH = 7,0, voorraadoplossing

Los 119,15 g HEPES in 400ml gedistilleerd water op, voeg 0,5 NaOH-~ 1m waterige oplossing toe om minstens vereiste pH (de efficiënte pH waaier van HEPES is 6,8 ~ 8,2), dan moeilijke situatie het volume aan 500ml met gedistilleerd water en opslag bij 4 ℃ aan te passen.

2, HEPES-bufferformule met kleine hoeveelheid zout (500ml)

HEPES 6.5g, NaCl 8.0g, na2hpo4.7h2o 0.198g, passen pH waarde met 0.5m de oplossing van NaOH, * en toen moeilijke situatievolume aan.

3, Voorbereiding van 2 de buffer zoute oplossing van × HEPES

Los 1.6g-NaCl, 0.074g-KCl, 0.027g na2hpo4.2h2o, 0.2g-dextran en 1g HEPES in 90ml gedistilleerd water op, pas aan de vereiste pH waarde met 0.5m NaOH aan, en bevestig dan het volume aan 100ml met gedistilleerd water.

Er zijn twee manieren om HEPES te gebruiken

(1) HEPES kan direct in het voorbereide cultuurmiddel volgens de vereiste concentratie worden toegevoegd, en dan worden gefiltreerd om bacteriën te verwijderen. Voeg 2.38g HEPES in elk 1000ml-cultuurmiddel toe, pas pH aan 7,2 met LN-NaOH na het oplossen, filter en gebruik na sterilisatie aan. De concentratie van HEPES was 10 mmol/L.

(2) het kan ook in 100 x opslagoplossing (L mol/L) worden gemaakt. V3o3or gebruik, voeg 99 van de cultuurml oplossing in 1 van de opslag toeml oplossing, * is de definitieve toepassingsconcentratie nog 10 mmol/L. Methods: 23.8g HEPES werd opgelost in 90ml verdubbelt gedistilleerd die water, aan pH 7.5-8.0 met LN-NaOH, en dan verdund aan 100ml met water wordt aangepast, gefiltreerd en gesteriliseerd, gepakt sub in kleine die flessen (2ml/fles) in, bij 4 ℃ wordt opgeslagen of - 20 ℃.

De definitieve concentratie van HES is 50 mmol/L, en men moet opmerken dat PES aan cellen niet-toxisch is. In het algemeen, de buffercapaciteit van HEPES met een concentratie van 20mmol/kan ik worden bereikt, en het is O.K. voor ons om het correct en buigzaam volgens de daadwerkelijke situatie voor te bereiden.

Nu is de specificatie van HEPES door Desheng wordt verkocht 25kg /vat, die ook volgens de aankoophoeveelheid die van klanten kan worden ingepakt. Groter de ordehoeveelheid, gunstiger de prijs. Welkom om te onderzoeken en opdracht te geven tot!