Acridine de ester kan DNA-schade ontdekken door formaldehyde dat en acetaldehyde wordt veroorzaakt!

Diverse exogene en endogene factoren, zoals milieuverontreinigende stoffen, ioniserende straling, drugchemotherapie, en celmetabolisme, kunnen diverse vormen van DNA-schade veroorzaken. Onder hen, DNA-hebben de dubbel-bundelonderbrekingen de ernstigste schade aan genoomstabiliteit en kunnen de overleving van cellen bedreigen. Het vestigen van een eenvoudige, snelle en gevoelige methode om de kruising en de genotoxiciteitsgevolgen van DNA te ontdekken is een zeer zinvol onderzoekonderwerp. Hier is een korte inleiding aan de methode van DNA-schadeopsporing.

Wat de soorten DNA-schadeopsporing zijn

DNA-de methodes van de schadeopsporing omvatten gelelektroforese, ultraviolette spectrofotometrie, fluorescentie en elektrochemie, en chemiluminescentieanalyse. De chemiluminescentieanalyse (cl) is wijd gebruikt in het gebied van milieu en het levenswetenschappen toe te schrijven aan zijn hoge gevoeligheid, brede lineaire waaier, geschikte verrichting, snelle analyse, en gemakkelijke automatisering. Het formaldehyde en acetaldehyde zijn beide milieuverontreinigende stoffen. In zekere mate, kan het DNA-schade veroorzaken. Bestudeer de hoeveelheid acridiniumesters ingebed in DNA before and after de schade van formaldehyde en acetaldehyde, veroorzakend veranderingen in de chemiluminescentieintensiteit van acridiniumesters, en bestudeer het schadegedrag van formaldehyde en acetaldehyde op DNA. Vestig een eenvoudige methode van de chemiluminescentieanalyse die de graad van DNA-schade te evalueren door formaldehyde en acetaldehyde wordt veroorzaakt.

Acridine estersmethode om milieuschade aan DNA te ontdekken

1. Eerst, doorweek de cel van de glasluminescentie in een bepaalde hoeveelheid geconcentreerd salpeterzuur voor verscheidene uren wordt gebruikt, verzuur, en toen spoeling met water dat. Voeg 20 μL van 1mg/mL-DNA van de kalfszwezerik aan de verzuurde luminescentiecel toe, en plaats het want 1 uur om DNA te maken op de bodem van de lichtgevende pool wordt geadsorbeerd, en unadsorbed toen DNA van de kalfszwezerik wordt gewassen met secundair water om de lichtgevende pool met geadsorbeerde DNA te verkrijgen.

2. Voeg 50μL van 9.6×10-7g/mL-acridiniumester aan de lichtende cel toe, en de chimerizationreactie is voor 1h VE in de double-stranded structuur van DNA in te bedden, en unchimeric VE met secundair water te reinigen. Tot slot in de lichtende cel voeg toe de reagentia van de luminescentieinitiatie de één na de ander die de chemiluminescentie te ontdekken door VE wordt geproduceerd in DNA chimerized. Wanneer het ontdekken van de schade van DNA van de kalfszwezerik door formaldehyde en acetaldehyde, voeg schadereagens aan DNA na chimerization van VE toe, en gebruik het na een bepaalde periode. Het tweede water reinigt bevrijd VE nadat DNA wordt beschadigd, en de reagens van de luminescentieinitiatie wordt toegevoegd om de chemiluminescentieintensiteit van VE te ontdekken hersenschimmig in DNA.

De studies hebben aangetoond dat de acridiniumester als chemiluminescentieindicator met een goede structuur kan worden gebruikt van het inlassen van de dubbele schroef van DNA. Deze opsporingsmethode is uitvoerbaar voor DNA-onderbrekingsschade en de methode van de chemiluminescentieopsporing. Het heeft de voordelen van eenvoud en gevoeligheid. De schadestudies verstrekken een eenvoudige onderzoekmethode. Deshengacridine hebben de ester lichtende tellers de eigenschappen van goede hydrolytische stabiliteit, thermische stabiliteit en hoge signal-to-noise verhouding, en de etiketteringsvoorwaarden zijn mild, is het etiketteringstarief hoog, en de scheiding beïnvloedt niet de scheiding na etikettering. , Zodat wordt het beschouwd als om een ideale chemische teller.