Toepassing van acridine ester in de etikettering van nucleic zuur

Acridine ester (nsp-dmae-nhs), geel poeder, CAS-nummer: 194357-64-7, is een belangrijk chemiluminescentie reagens.de etikettering vanacridineesterde etikettering is hoog en de etikettering heeft geen invloed op de scheiding.

Bovendien is het chemiluminescentieproces van acridineester snel met een lage achtergrond en kan het licht uitzenden in aanwezigheid van natriumhydroxide en waterstofperoxide.acridineester chemiluminescentie reagentia hebben een goede stabiliteit en zijn gemakkelijk op te slaan.

Naast de toepassing in immunoassay, kan acridineester ook worden gebruikt om oligonucleotide fragment probes te labelen voor gendetectie of microbiële detectie.Acridine-esterverbindingen zijn geschikt voor het labelen van DNA-strengen om chemiluminescentie-DNA-sondes te maken.

De resultaten van modern medisch onderzoek tonen aan dat veel ziekten zoals kanker en genetische ziekten verband houden met DNA-mutaties, en dat veel infectieziekten worden veroorzaakt door virussen,bacteriën of parasieten in het milieuDe analyse van de specifieke sequentie van het virus DNA is bevorderlijk voor het beheersen van de epidemische situatie.De detectie van DNA-sequentie en basismutatie in de DNA-streng is van groot belang bij de gen-screening, vroege diagnose en behandeling van genetische ziekten en detectie van pathogene genen.

In de nucleïnezuurhybrideringsanalyse is de voorbereiding van een specifieke en gevoelige gelabelde sonde de sleutel tot het succes van de nucleïnezuurhybrideringsanalyse.Acridine-esterderivaten kunnen rechtstreeks worden gelabeld op de nucleïnezuursonde zonder katalysator en de luminescentie kwantumopbrengst wordt niet beïnvloedBovendien wordt onder bepaalde omstandigheden de acridineester die op het niet-hybride enkelstreng DNA is gemarkeerd gehydrolyseerd en vernietigd.Alleen acridineester kan chemiluminescentie veroorzaken., en het hele hybridisatieproces kan zonder scheiding worden gevolgd.

De uitvinding heeft betrekking op een methode voor het etiketteren van nucleïnezuur met acridineester, die de volgende stappen omvat:

(1) De 5e en 3e uiteinden van de DNA-sonde zijn beschermd;

(2) Etikettering van acridineester: 25 mm NHS acridineester werd opgelost in DMSO en 1 m HEPES-buffer (pH = 8,0) werd bereid.5, werd het toegevoegd aan HEPES-buffer en reageerde gedurende 1 uur bij 37 °C;

In stap 1 omvat de bescherming van de 5' en 3' uiteinden van de DNA-sonde specifiek: het gebruik van s-ethyltrifluorothioacetaat om de 5' uiteinden van de DNA-sonde te beschermen;met behulp van s-ethyltrifluorothioacetaat ter bescherming van 3'-end-nh2.

Desheng technologie heeft onderzoek en ontwikkelingchemiluminescentie-reagentiaDe acridine-ester is een acridine-energie-element dat wordt gebruikt om acridine-esteren te produceren.Er zijn luminol en isoluminol.De acridineesterreeks heeft een hoog lichtvermogen en behoort tot de directe luminescentie.