Toepassing van CAPS (CAS 1135-40-6) in Eiwittransmembraanexperiment

Inleiding

GROOTBOEKEN, 3- ((cyclohexylamine) 1-propanesulfonsyre, een organische chemische stof, wit kristallijns poeder, CAS1135-40-6, is een biologische buffer, die vaak wordt gebruikt in biochemische diagnostische kits,DNA/RNA-extractie- sets en PCR-diagnostische kitsBuffer voor enzymchemie en HPLC-separatie van basismedicijnen wordt veel gebruikt in het membraantransferproces van proteïne sequencing.GROOTBOEKENBuffer bestaat uit:GROOTBOEKENDe pH van het water wordt aangepast op 11,0 voor de zuivering van fibronectine.

CAPS-buffer

Belangrijkste operationele punten

1. SDS-PAGE elektroforese: onder conventionele omstandigheden (CAPS-systeem: voor > = 20 kD eiwitten; Tris-Tricine-systeem: voor eiwitten met een laag moleculair gewicht, ook voor eiwitten met een hoog moleculair gewicht);

2Methanolconcentratie: het methanolconcentratiebereik in CAPS-buffer is 0-20% (methanolconcentratie is hoog, wordt gebruikt voor eiwitoverdracht met een laag moleculair gewicht;methanolconcentratie is laag of bevat zelfs geen methanol, gebruikt voor de overdracht van eiwitten met een hoog moleculair gewicht);

3.PVDF-membraanbehandeling: haal het PVDF-membraan uit, week het gedurende enkele seconden in methanol en stop het vervolgens in de CAPS-buffer voor elektroblotting (opmerking:het PVDF-membraan mag na gebruik niet uitdrogen;. Als het membraan droog is, herhaalt u deze stap);

4. Gelbehandeling: verwijder gelgel en week het 5-10 minuten in CAPS buffer (opmerking: deze stap kan worden overgeslagen bij het overbrengen van sommige sterke basische eiwitten PI > 9,0);

5. Installeer de overdrachtsslot: dompel het filterpapier en de spons in de buffer voor elektro-blotting, druk vervolgens op de elektrische imprinting sandwich in de volgorde van spons, filterpapier, PVDF film, gel,filterpapier en spons, en zet het in een kleine elektrische roterende slot.

6. overdrachtcondities: overdracht onder constante druk van 50 V (100-170 MA) bij kamertemperatuur gedurende 0,5 tot 2 uur. (Opmerking: de bubbels tussen de gel en de PVDF-film worden afgevoerd.het eiwit boven 70 KD moet langer worden overgedragen);

7. Voorbehandeling van het verven van PVDF-membranen: PVDF-membranen verwijderen en spoelen met gedeïoniseerd water, in methanol weken gedurende enkele seconden en vervolgens verven;

8Membraanverf: Coomassie brilliant blauw verf (oplossen van 0,1% Coomassie brilliant blauw R-250 in 40% methanol/1% azijnzuur) gedurende 30-50 seconden (maximaal 1 minuut),verkleuren met 50% methanol (verander de verkleuring vaak), volledig wassen met gedeïoniseerd water en vervolgens drogen;

CAPS bufferpreparatie

1. 10×CAPS(100 mmol/l) bufferoplossing wordt als volgt bereid: CAPS, 22,13 g; toegevoegd gedeïoniseerd water tot 900 ml; de pH-waarde op 11,0 aangepast met 2 mol/l NaOH (ongeveer 20 ml), vervolgens tot 1 l verdund en bij 4°C bewaard.

2. Het CAPS-buffer voor elektro-impressie (1 × CAPS met 10% methanol) wordt bereid volgens de volgende methoden: 200 ml 10 × CAPS; 200 ml methanol; 1600 ml gedeïoniseerd water.

Andere toepassingen

GROOTBOEKENwordt ook gebruikt voor de vervaardiging van lasmaterialen, airconditioningapparatuur en grondstoffen voor de productie; wordt ook gebruikt voor de vervaardiging van pyrotechnische stoffen; wordt gebruikt als analytisch reagens;warmtewisselaar, en wordt ook gebruikt in de farmaceutische industrie; wordt gebruikt voor airconditioning, pyrotechniek, droge batterijen; wordt ook gebruikt als vloeistof en droogmiddel;het wordt gebruikt voor het uitharden van waterig isocyanat in de verfindustrieDesheng is gespecialiseerd in onderzoek en ontwikkeling en productie van verschillende biologische buffers, waaronder CAPS, Tris, Bicine, MOPS, enz. met een hoge zuiverheid ≥ 99%, stabiel proces,het verwelkomen van ondernemingen en particulieren voor verdere overleg.