Toepassing van CAPS (CAS 1135-40-6) in Eiwittransmembraanexperiment

Inleiding

CAPS, 3 (cyclohexylamine) - het 1-propanesulfonic zuur, een organisch chemisch, wit kristallijn poeder, cas1135-40-6, is een biologische die buffer, algemeen in biochemische kenmerkende uitrustingen, DNA/RNA-extractieuitrustingen en PCR kenmerkende uitrustingen wordt gebruikt. De buffer voor enzymchemie en HPLC scheiding van basisdrugs wordt wijd gebruikt in het proces van de membraanoverdracht van protei het rangschikken. CAPS-de buffer is samengesteld uit CAPS, gedeioniseerd water, enz., en zijn pH wordt aangepast aan 11,0 voor purificationoffibronectin.

CAPS-buffer

Belangrijke punten van verrichting

1. Sds-PAGINA elektroforese: volgens de conventionele voorwaarden (CAPS-systeem: voor > = 20kD-proteïne; Het systeem van Tristricine: voor lage - molecuulgewichtproteïne, ook voor hoogte - molecuulgewichtproteïne);

2. Methanolconcentratie: de waaier van methanolconcentratie in CAPS die buffer electroimprinting is 0-20% (de methanolconcentratie is hoog, gebruikt voor laag - molecuulgewicht eiwitoverdracht; de methanolconcentratie is laag of zelfs bevat geen methanol, voor hoogte wordt gebruikt - molecuulgewicht eiwitoverdracht die);

3.PVDF membraanbehandeling: neem het PVDF-membraan, doorweek het in methanol voor verscheidene seconden, en zet het dan in CAPS die buffer electroblotting. (Nota: het PVDF-membraan zal worden verhinderd na verrichting op te drogen. Als het membraan droog is, herhaal de verrichting van deze stap);

4. Gelbehandeling: verwijder gelgel en doorweek in CAPS-buffer 5-10 minuten. (Nota: deze stap kan worden weggelaten wanneer het overbrengen van sommige sterke basisproteïnen pi > 9,0);

5. Installeer de overdrachtgroef: dompel het filtreerpapier onder en spons in de elektro bevlekkende buffer af, dan druk de elektro stempelende sandwich in de orde van spons, filtreerpapier, PVDF-film, gel, filtreerpapier en spons, en zet het in een kleine elektrische roterende groef.

6. Overdrachtvoorwaarden: overdracht bij de constante druk van 50V (100-170 doctorandus in de letteren) bij kamertemperatuur voor 0.5-2h. (Nota: voer de bellen tussen het gel en PVDF-film af. Bijvoorbeeld, zou de proteïne boven 70 KD voor langere tijd) moeten worden overgebracht;

7. Voorbehandeling van PVDF-membraan die verven: neem PVDF-membraan en spoel het met gedeioniseerd water, doorweken het in methanol voor verscheidene seconden, dan kleurstof het;

8. Membraan die verven: (Los 0,1% briljant blauw r-250 van Coomassie in 40% methanol/1% op azijnzuur) verven 30-50 seconden (niet meer dan 1 minuut), met 50%-methanol (verandering het verkleuren oplossing vaak) verkleuren, met gedeioniseerd water volledig wassen, en dan Coomassie briljant blauw die drogen;

CAPSbuffer voorbereiding

1. 10×CAPS (100mmol/L) wordt de bufferoplossing voorbereid als volgt: CAPS, 22.13g; voeg gedeioniseerd water aan 900ml toe; pas de pH waarde aan 11,0 met 2mol/L-NaOH (ongeveer 20ml) aan, dan verdun aan 1L, en opslag bij 4℃.

2. CAPS die buffer (1×CAPS die 10%-methanol bevatten) electroimprinting wordt voorbereid door de volgende methodes: 200ml van 10 × CAPS; 200ml van methanol; 1600ml van gedeioniseerd water.

Andere toepassingen

CAPS wordt ook gebruikt om lassenmaterialen, airconditioningsuitrusting en grondstoffen te vervaardigen voor productie; het wordt ook gebruikt om pyrotechniek te vervaardigen; het wordt gebruikt als analytische reagens, de drager van de hitteuitwisseling, en in de farmaceutische industrie ook gebruikt; het wordt gebruikt voor airconditioning, pyrotechniek, droge batterijen; het wordt ook gebruikt als stroom en deshydratiemiddel; het wordt gebruikt voor genezende agent van waterig isocyanaat in de verfindustrie. Het Deshengbedrijf specialiseert zich in R&D en productie van diverse biologische buffers, met inbegrip van CAPS, Tris, Bicine, ZWABBERS, enz., met hoge zuiverheid ≥ 99%, stabiel proces, welkome ondernemingen en individuen aan verder overleg.