In moleculaire biologische experimenten zijn DNA-precipitatie en -extractie fundamentele stappen in genonderzoek, klonentechnologie en de ontwikkeling van diagnostisch reagens.de keuze vanbiologische bufferactiesHet is niet mogelijk dat de biologische diversiteit van DNA direct van invloed is op de zuiverheid, integriteit en experimentele efficiëntie van DNA.Trimethylmethylaminoethanesulfonsuur (TES-buffer), heeft als efficiënt bufferafval aanzienlijke voordelen aangetoond op het gebied van DNA-manipulatie vanwege zijn unieke fysisch-chemische eigenschappen en stabiliteit.
De chemische eigenschappen van TES: de wetenschappelijke basis voor de buffercapaciteit
TES, de chemische naam is 2- [trihydroxymethyl) methylamino] -1-ethanesulfonsyre,en de sulfozurengroepen en meerdere hydroxylgroepen in de moleculaire structuur geven het een uitstekend buffervermogenBij kamertemperatuur is de pKa-waarde van TES 7.5, en het effectieve bufferbereik bedraagt een pH van 6,8-8.2In vergelijking met de traditionele buffer Tris (buffer pH-bereik 7,0-9,0),TES vertoont een sterkere weerstand tegen temperatuursveranderingen en kan het risico op DNA-degradatie door lage temperatuur effectief voorkomen.
Drievoudige kernrol bij DNA-extractie
1Cellyse en eiwit verwijdering
Tijdens de cellysestadium remt TES de activiteit van DNA-enzymen en beschermt het genomisch DNA tegen afbraak door divalente metaalionen (zoals Mg 2 +, Ca 2 +) in de oplossing te chelateren.Het buffersysteem houdt tegelijkertijd de optimale pH-waarde in voor proteasen zoals protease K (meestal pH 7.5-8.0), die de afbraak van celmembranen en de afbraak van eiwitten versnelt.Experimenten hebben aangetoond dat de eiwitverwijderingsdoeltreffendheid van het lysesysteem met behulp van TES-buffer met ongeveer 25% is verbeterd in vergelijking met traditionele methoden., waardoor een goede basis wordt gelegd voor de volgende zuiveringstappen.
2. Selectieve regulering van DNA-neerslag
TES is een samengestelde bufferoplossing bestaande uit Tris-zoutzuur, EDTA en SDS (TES-EDTA-SDS), die selectieve neerslag van DNA bereikt door de ionensterkte van de oplossing aan te passen.Bij hoge zoutconcentraties (zoals 2.5M NaCl), werken de sulfonsuregroepen van TES door middel van elektrostatisch afscherming, waardoor de afstoting van fosfaatgroepen tussen DNA-moleculen wordt bevorderd en een oplosbare toestand wordt gevormd;Wanneer de zoutconcentratie onder 0 daalt.5M, DNA-aggregaten en precipitaten als gevolg van blootstelling van de fosfaatruggengraat.
3. bescherming van enzymactiviteit
Het beschermende effect van de TES-buffer op de enzymactiviteit is bijzonder prominent bij het beperken van enzymscheiding.Onderzoek heeft aangetoond dat de snijdoeltreffendheid van restrictie-enzymen (zoals EcoRI) met behulp van het TES-reactiesysteem 18% -22% hoger is dan die van HEPES-bufferDe stabiele pH-omgeving vermindert enzymconformatieveranderingen, verlengt de lineaire periode van enzymsplitsingsreacties en zorgt voor de nauwkeurigheid van genbewerkingsexperimenten.
Conclusies
TES-buffer vertoont onvervangbare voordelen bij DNA-neerslag en -extractie vanwege zijn uitstekende pH-stabiliteit, metalen ionchelatie-eigenschappen en enzymbeschermingseffect.Door de experimentele omstandigheden te optimaliseren en nieuwe toepassingsscenario's te onderzoeken, zal TES het onderzoek in moleculaire biologie verder in een efficiëntere en preciezere richting leiden.Het beheersen van het buffermechanisme en de toepassingstechnieken van TES is ongetwijfeld de sleutel tot het verbeteren van het succespercentage van experimenten.
TES-buffer wordt niet alleen gebruikt in cosmetica, maar speelt ook een belangrijke rol bij de analyse van eiwitten, het bepalen van enzymactiviteit en celcultuur.TES-buffer, Desheng kan leveren van hoge zuiverheid en verschillende soorten buffer grondstoffen. Klanten kunnen compleet één-stop inkoop, het besparen van tijd en kosten.Voel je vrij om contact met ons op te nemen voor de aankoop op elk moment!
Uw bericht moet tussen de 20-3.000 tekens bevatten!
