Op het gebied van in vitro-diagnostiek worden zowel de chemiluminescentie-immunoassay CLIA als de immunofluorescentie-analyse IFA vaak gebruikt.en uiteindelijk worden beide gedetecteerd door een fotometer, maar de beginselen van beide zijn wezenlijk verschillend.
In vergelijking met de radio-immunanalyse, de fluorescentie-immunanalyse en de enzymgebonden immunanalyse heeft de chemiluminescentie-immunanalyse meer voordelen.sterke specificiteitHet is bovendien stralingsvrij, heeft een lange geldigheidsduur en kan volledig geautomatiseerd worden.
Chemiluminescentie-reactief acridinium ester
Het verschil tussen chemiluminescentie- en fluorescentie-immuniteit:
Hoewel beide luminescentie reacties zijn, is het meest intuïtieve verschil dat chemiluminescentie de eigen luminescentie van het reagens is,terwijl fluorescentie wordt bestraald met een lichtbron (meestal ultraviolet) en dan licht uitstraaltHet licht uitstralingsprincipe van de twee is verschillend, dus de detectie resultaten zullen ook verschillen.
Chemiluminescentie is het gebruik van energie die wordt gegenereerd door een chemische reactie om energieniveauovergangen te induceren om licht uit te zenden, zoals luminol dat bloedvlekken detecteert.fluorescentie is een fotoluminescentie verschijnsel, en een lichtbron moet worden verstrekt om moleculen te prikkelen om energieniveauovergangen te produceren en vervolgens licht uit te zenden.
Chemiluminescentie is minder storend dan fluorescentie-immuniteit:
Wanneer deze twee methoden voor immunoassays worden gebruikt, is het verschil duidelijk: chemiluminescentie vereist geen externe lichtbron en de achtergrondinterferentie is klein;terwijl fluorescentie een externe lichtbron vereistBij detectie in de richting van de verticale lichtbron worden ook het eiwit, de aminozuren en andere moleculen in het biologische monster gedetecteerd.en de achtergrond is iets hogerHet is noodzakelijk om geschikte fluorescerende reagentia en methoden voor de verwerking van monsters te kiezen om de invloed van niet-specifieke adsorptie van eiwitten te verminderen.
Bij de directe methode moet het antilichaam van elk antigeen fluorescerend worden gelabeld, en het fluorescerend gelabelde kan de antilichaamtiter beïnvloeden of zelfs ongeldig worden.De indirecte methode hoeft alleen het overeenkomstige antilichaam aan het overeenkomstige antigeen te maken.Het hoeft niet voor elk antilichaam fluorescerend te worden gemarkeerd, en het heeft weinig effect op de titer van het primaire antilichaam.De chemiluminescentie-interferentie is zeer klein en de specificiteit zeer hoogHet gebruik van de gehele methode wordt beperkt door de niet-specifiekheid van de chemische analyse zelf.De ontwikkeling van magnetische kralenmateriaal heeft de ontwikkeling van chemiluminescentietechnologie steeds volwassener gemaakt.
In de ontwikkeling van in vitro-diagnostische reagentia heeft Desheng succes behaald met zowel enzymgebonden immunoassay-reagentia als chemiluminescentie-reagentia. Luminol en isoluminol zijn alle noodzakelijke reagentia in chemiluminescentie-immunoassays. .