HEPES-buffer: de 'onzichtbare assistent' bij het opsporen van rabiësvirussen

4-hydroxyethylpiperazine ethanesulfonsyre, afgekort alsHEPESHet verschijnt als een wit kristallijn poeder en heeft een stabiel pH-bereik tussen 6,8 en 8.2Als biologisch buffermiddel is het reguleren van de pH het meest gebruikelijke gebruik en wordt het door grote fabrikanten op het gebied van huidverzorging zeer favoriet.zijn cruciale rol bij het opsporen van rabiësvirussen is weinig bekend, en we zullen hieronder een gedetailleerde inleiding geven.

Het dilemma van de traditionele methoden voor het opsporen van rabiësvirussen

Wanneer het hondsdolheidvirus zich voortplant in geïnfecteerde cellen, veroorzaakt het meestal geen cytopathische effecten (CPE) en is het ook moeilijk om plaques te vormen onder conventionele cultuuromstandigheden.Hoewel veel wetenschappers in binnen- en buitenland met succes hebben vastgesteld rabiës virus plaque methoden op kippen embryocellen en BHK-21 cellenDeze methoden hebben duidelijke nadelen: sommige hebben uiterst strenge eisen aan de proefomstandigheden en vereisen een nauwkeurige controle van verschillende factoren, zoals temperatuur, luchtvochtigheid,samenstelling van het gas, enz. Sommige bewerkingsstappen zijn ingewikkeld en vereisen dat professionele technici een langdurige opleiding volgen om ze vakkundig te beheersen,De Commissie is van mening dat de toepassing van deze methode in het kader van het onderzoek moet worden beperkt..

Doorbraak in de toepassing van HEPES bij het opsporen van rabiësvirussen

Onderzoekers ontdekten per ongeluk dat HEPES het pathogene effect van het hondsdolheidvirus op besmette cellen kan versterken.Onderzoekers hebben op innovatieve wijze een eenvoudige en snelle HEPES plaque etching methode voor rabiësvirus ontwikkeld.

HEPES bevordert de vorming van corrosievlekken aanzienlijk

In het experiment werden geïnfecteerde cellen gedurende 3-5 dagen gekweekt bij 37 °C en vervolgens werd één groep geïnfecteerde cellen behandeld met HEPES.duidelijk zichtbare cellulaire laesies aan de onderkant van de bekledingVervolgens werd een kristalviolette kleur gebruikt en de corrosievlekken waren duidelijk zichtbaar.de geïnfecteerde celgroep zonder HEPES-behandeling vertoonde geen cytopathische effecten noch plaquevormingDit experimentele resultaat toont sterk aan dat HEPES een significant bevorderingseffect heeft op de vorming van plaque van het hondsdolheidvirus op BHK-cellen.

HEPES-etseringsmethode heeft een hoge gevoeligheid

De HEPES-plaque-test is niet alleen eenvoudig te gebruiken, maar presteert ook goed bij het titreren van virusinfectie titers.Experimentele gegevens tonen aan dat er een duidelijke titerrelatie bestaat tussen het aantal plaques dat na een virale infectie wordt gevormd en de verdunning van het virus.De infectie titers werden bepaald met behulp van respectievelijk HEPES plaque assay en muis assay, waarbij de CTN-BHK stam van rabiësvirus als voorbeeld werd genomen.het aantal plaques gemeten met de HEPES-plaque methode varieerde van 1.0 × 10 ° tot 4,0 × 10 * PFU/ml, terwijl de met de muismethode gemeten infectietiteringen tussen 6,0-6,8 log of 1,0 × 10 ° tot 6,3 × 10/ml lagen.Dit resultaat toont volledig aan dat de snelle HEPES-plaque-methode en de muismethode in hun gevoeligheid overeenstemmen..

De HEPES-etsenmethode heeft uitstekende voordelen

Bij het bestuderen van de titratie van de infectietiter van de hondsdolheidvirusstammen CTN-181 en CTN-BNKbleek dat het gebruik van HEPES het pathogene effect van het rabiësvirus op geïnfecteerde cellen effectief kan induceren en versterkenDe specifieke werkingsmethode is als volgt: na virusinfectie van cellen, cultiveren deze gedurende 3-5 dagen bij 37 °C.50-100 mmol/L HEPES in druppels op de dekking van het halfvaste medium methyllulose worden toegevoegd, na 24 uur met een kristalviolette oplossing bevlekken en bij kamertemperatuur drogen om met het blote oog het aantal corrosievlekken direct te berekenen.Vergeleken met eerdere literatuurverslagen over etseringsmethodenDeze methode heeft vele voordelen, zoals snelheid, eenvoud, zuinigheid, gevoeligheid en gemakkelijke beheersing.

Het door Desheng Company geproduceerde HEPES bereikt het reagensniveau met een zuiverheid van meer dan 99%.We hebben samenwerkingsverbanden met tal van fabrikanten.. Voor het gemak van de klant ervaring, kan het bedrijf bieden gratis monsters voor de proef. Desheng zal altijd voldoen aan zijn oorspronkelijke bedoeling en bieden klanten met hoogwaardige producten.Als u vragen of behoeften heeft, klik op de officiële website voor meer informatie of neem rechtstreeks contact met mij op!