Het kiezen van de juiste biologische buffer voor het experiment kan een moeilijke taak zijn. Er zijn vele beschikbare opties (Hepes, Zwabbers, Tris, BIB-Tris, enz.), die verwarring kunnen gemakkelijk veroorzaken.
Na het begrip van deze uitdagingen, heeft Desheng een korte lijst voor uw verwijzing wanneer het kiezen van bufferzouten voor onderzoek voorbereid:
1. Bufferwaaier
Elke bufferreagens heeft een pH waaier met de sterkste buffercapaciteit. Deze buffercapaciteit wordt gewoonlijk bepaald door pKa van de bufferreagens. U moet een buffer met een pKawaarde dicht bij het midden van de gewenste waaier (typisch, wordt het geadviseerd om een buffer met een pKawaarde te gebruiken die op zijn minst binnen één pH eenheid van het doel pH is) kiezen.
De toepasselijke pH waaier van elke buffer
2. pH veranderingen tijdens het experiment
Vooraf overwegen of de pH waarde tijdens het experiment kan stijgen of verminderen is kritiek aan de selectie van buffers. Als u denkt zal pH tijdens het experiment stijgen, moet u een buffer met een pKa lichtjes kiezen hoger dan de optimale waarde aan het begin van het experiment. Het tegengestelde is ook waar: als u denkt zal pH, kiest een buffer met een lagere pKa verminderen.
3. Bufferconcentratie
De bufferconcentratie moet worden aangepast om voldoende buffercapaciteit voor het experimentele systeem te hebben. In het algemeen als de bufferconcentratie te laag is, kan pH van de oplossing niet worden gestabiliseerd. Omgekeerd, als de concentratie te hoog is, zal de buffer waarschijnlijk het experiment beïnvloeden. Over het algemeen, wordt het geadviseerd om een concentratie te gebruiken hoger dan 25mM.
Voor systemen waarin de uitwisseling van het waterstofproton niet actief is, wordt een concentratie van 25100mM over het algemeen geadviseerd. Voor systemen waar de protonuitwisseling kan voorkomen, wordt het geadviseerd om een bufferconcentratie 20times te gebruiken hoger dan de maalconcentratie van de geruilde protonen.
4. Temperatuurverandering
U moet pH van de bufferoplossing volgens de temperatuur plaatsen waarbij het experiment zal worden uitgevoerd. De temperatuur beïnvloedt pKa van de buffer, en direct zo pH en de buffercapaciteit van het systeem. Deze situatie kan in biologische systemen kritiek zijn, waar de nauwkeurige concentraties van het waterstofion voor het reactiesysteem om bij maximumefficiency worden vereist te werken.
PKa van sommige buffers (zoals PIJPEN) is minder gevoelig voor temperatuurveranderingen, maar andere opties (zoals TRIS, AZEN, kranen, TES, of Tricine) worden meer beïnvloed door deze veranderingen.
De figuur toont hieronder de benaderende pKaverandering volgens de temperatuur van Desheng Biobuffer:
Benaderende pKaverandering van de Temperatuur van Desheng Biobuffer
Desheng is één van de grootste fabrikanten van biologische buffers in de wereld. Onze producten worden verscheept dagelijks aan hoogste onderzoekscentra en biotechnologiebedrijven in Europa, Amerika en Azië. Onze producten worden onafhankelijk ontwikkeld en geproduceerd. Wij kunnen producten verstrekken die aan de kwaliteit en verpakkingsbehoeften van onze klanten voldoen. Wij verstrekken kleine pakketten en bulkpakketten (van gram aan ton). Zij kunnen worden geleverd wereldwijd om vervoer bij te staan, en de uitvoerige en krachtige naverkoopdienst te verlenen. Het verheugen zich op uw vraag naar verder overleg! Tel.: +86-711-3702650. Website: www.vacutaineradditives.com.
