Belangrijkste Toepassing van MES-buffer in Fosfaatcellulose Kolomchromatografie

Phosfaatcellulose-kolomchromatografie, als een van de kerntechnologieën op het gebied van biologische molecuulscheiding en -zuivering,speelt een belangrijke rol bij de bereiding van biomoleculen zoals eiwitten en nucleïnezuren vanwege zijn efficiënte adsorptie- en scheidingsactiviteitenHet kernprincipe van deze technologie is het gebruik van de specifieke binding tussen de fosfaatgroepen op het oppervlak van fosfaatcellulose en biomoleculen.zoals elektrostatische interacties en waterstofbindingIn dit proces hebben de selectie en optimalisatie van buffer rechtstreeks invloed op het chromatografische effect, en MES buffer,vanwege zijn unieke fysisch-chemische eigenschappen, is de ideale keuze geworden voor het balanceren en elueren van stappen in deze technologie.

De primaire toepassing vanMES-buffer(2-morfoline-ethanesulfonsuur buffer) in fosfocellulose kolomchromatografie is als een evenwichtsoplossing, waardoor een stabiele beginomgeving voor het chromatografie systeem.Voordat met de chromatografie wordt begonnen, a large amount of equilibrium solution needs to flow through the chromatography column to achieve thermodynamic equilibrium between the stationary phase (cellulose phosphate medium) and the mobile phase (MES buffer)De fosfaatgroepen op het oppervlak van het fosfaatcellulose-medium zullen onder specifieke pH-omstandigheden dissociëren.en het pH-bufferbereik van de MES-bufferoplossing precies overeenkomt met het optimale werkings pH-bereik van fosfaatcelluloseDeze stabiliteit zorgt ervoor dat de kolom vóór het opladen van het monster in een gelijkmatige begintoestand is,effectief vermijden van verschillen in adsorptie-efficiëntie als gevolg van lokale pH-schommelingen, en het leggen van de basis voor de herhaalbaarheid en stabiliteit van de latere scheiding.de uiterst lage UV-absorptie van MES-buffer vermindert ook de interferentie met de detectie van het doelmolecuul.

Tijdens de elutiefase bereikt de MES-buffer een gradiëntseparatie van biomoleculen door de ionsterkte en de pH-waarde nauwkeurig te reguleren.De bindsterkte tussen biomoleculen en fosfaatcellulose hangt af van de elektrostatische aantrekking tussen de oppervlaktelading van het molecuul en de fosfaatgroepen in het mediumIn experimenten wordt meestal een gemengd systeem van MES-buffer en natriumchloride gebruikt.Door de concentratie van natriumchloride geleidelijk te verhogen (i.d.w.z. het verhogen van de ionensterkte), concurreren de ionen in de oplossing met biomoleculen om zich te binden aan de geladen plaatsen op het oppervlak van fosfocellulose,waardoor de interactie tussen biomoleculen en het medium wordt verzwaktDoor de verschillen in geladen eigenschappen en moleculair gewicht van verschillende biomoleculen varieert hun bindsterkte aan het medium.zij worden achtereenvolgens geëluteerd in MES-bufferoplossingen met verschillende ionensterkte om scheiding en zuivering te bereiken.

Bovendien heeft MES-buffer een hoge chemische stabiliteit en reageert het niet gemakkelijk met biomoleculen tijdens chromatografie,die de natuurlijke structuur en activiteit van biomoleculen effectief kan behoudenDit is cruciaal voor latere functioneel onderzoek of toepassingen.De goede oplosbaarheid en lage osmotische druk verminderen ook de schade aan de chromatografische kolom en de mogelijke impact op biomoleculen.

Kortom, MES buffer plays an irreplaceable key role in phosphocellulose column chromatography technology by serving as an equilibrium solution to ensure the initial stability of the chromatography system and as an eluent to achieve precise separation of biomolecules through ion strength regulationHet biedt een efficiënte en betrouwbare oplossing voor de scheiding en zuivering van biomoleculen.

Als een gunstige fabrikant van MES buffer,Desheng, met zijn professionele R & D-team, geavanceerde productietechnologie en strikt kwaliteitscontrolesysteem, kan stabiel leveren van hoogwaardige MES-bufferproducten met een hoge zuiverheid, goede stabiliteit,en uitstekende biocompatibiliteitAls u relevante voornemens heeft, klik dan op de website om informatie te vragen en te kopen!