Methode om enzym en kleurvormend substraat in Trinder-reactie te stabiliseren

Op het gebied van in vitro-diagnostiek is enzymcolorimetrie een veelgebruikte methode voor kwantitatieve of kwalitatieve testen van doelcomponenten en wordt deze veel gebruikt in China.zoals de detectiemethode van de kleurreactie van het door het chromogene substraat gekaataliseerde enzym HRPTOOSDoor de deelname van enzymen is het zeer waardevol om de stabiliteit van het kleursubstraat met enzymactiviteit te verbeteren.

Sommige reactieproducten met chromogene substraten met een hoge molerabsorptie, zoals TOOS, TOPS, enz., kunnen zowel in natte chemische methoden als in droge chemische methoden worden gebruikt:de vereiste reactiereagentia (TOOS), 4-AAP) en de benodigde enzymen (HRP) enz.) Het wordt bevestigd op de membraandrager en het monster wordt druppelings toegevoegd om H2O2 te genereren en vervolgens nieuwe ecologische zuurstof vrij te geven,oxideren van het kleursubstraatEnzymen zijn zeer specifiek en zeer efficiënt in de katalyse.Ze hebben een slechte stabiliteit onder invloed van temperatuurIn natte chemische methoden worden enzymen gemakkelijk geïnactiveerd wanneer ze in een vloeibare toestand of bij lage concentraties zijn.

Chromogeen substraat TOOS poeder

Aan de andere kant worden de meeste chromogene substraten, zoals TOOS, MAOS, TMB, enz., ook gemakkelijk en langzaam geoxideerd, zodat hun oplossingen niet lang aan de lucht kunnen worden blootgesteld.Er zijn veel manieren om de stabiliteit van biologisch actieve enzymen en chromogene substraten te verbeteren:

1Het toevoegen van enzymoplossingsbeschermingsmiddel kan de activiteit van verschillende enzymen zoals ALT, AST, LDH, ALP, CK in waterige oplossing of serummatrix stabiel maken gedurende 2 weken bij kamertemperatuur.maar het effect op droog chemisch testpapier is niet significant.

2De kleurontwikkelende substraatstabilisatiemethode maakt gebruik van oppervlakteactieve stoffen en flavonoïde pigmentstoffen met een alkylgroep met 8 tot 16 koolstofatomen, maar de formule is ingewikkeld.de reagentia zijn moeilijk te kopen, en het beschermingsmiddel beïnvloedt de testresultaten.

3Er is een beschermend middel dat meer reduceerbaar is dan het kleurontwikkelende substraat, maar het toegevoegde beschermend middel bevat primaire amino-groepen en veroorzaakt vaak niet-specifieke reacties.

4Het gebruik van azo-kleurstoffen als stabilisatoren van het kleurontwikkelende substraat heeft een goed stabiliserend effect en veroorzaakt geen interferentie.maar de maximale absorptiegolflengte van de kleurstof is soms dicht bij die van de kleurverwekkende stof, waardoor de lege controle iets hoger is.

5Een beschermend middel voor het polymeer en de samenstelling ervan, dat de stabiliteit van enzymen en chromogene substraten kan verbeteren.geschikt voor HRP, CHO, enz. Enzym, geschikt voor de detectie van glucose, creatinine, urinezuur, cholesterol, triglyceriden en andere indicatoren.

Het is te zien dat verschillende bestaande beschermende middelen voor enzymen ofchromogene substraten, waarvan sommige defect zijn, zoals hoge kosten, vertekende detectie en alleen geschikt zijn voor natte chemische methoden, enz.,De methode moet verder worden onderzocht.Desheng is een fabrikant van chromogene substraten en enzymen.