Optimalisering van BOVENKANTENmethode voor Bepaling van Vrije Vetzuren

De bepaling van vrije vetzuren in serum of plasma keurt Trinder-gewoonlijk photometric methode van het chromogene stofenzym goed. Nochtans, wegens de kenmerken van deze test, wordt de opsporing van vetzuren beïnvloed door vele factoren, en de opsporingsmethode moet worden geoptimaliseerd en worden verbeterd om de nauwkeurigheid van de opsporing te verbeteren.

De opsporingsffa principe van de Trinderchromogene stof:

De opsporingsmethode heeft drie reactiestappen: de vrije vetzuren (FFA of NEFA) reageren met bovenmatige CoA om acyl-CoA onder de actie van synthase acetyl-CoA (ACS) te produceren, en reageren met zuurstof onder de actie van oxydase acetyl-CoA (ACO). De reactie produceert 2,3 trans-enoyl CoA en waterstofperoxyde, en de Trinder-reactie wordt gebruikt om waterstofperoxyde te ontdekken, en de inhoud van FFA kan worden verkregen.

De BOVENKANTEN wordt geadviseerd voor FFA-bepaling van chromogene stof

Problemen in de bepaling en de optimaliseringsmethodes van FFA:

1. Bovenmatige Coenzyme A in de reactie zal zich in de reactie die van waterstofperoxyde en Trinder-chromogene stof, het gehele testresultaat laag maken mengen. N-Ethylmaleimide (NEM) kan worden gebruikt om bovenmatige Coenzyme A. te verwijderen. De stabiliteit van NEM is zeer beïnvloed. Beperkt, slechts één week.

2. Acetyl CoA-gebruikte synthetase en acetyl CoA-de oxydase hebben verschillende substraatspecificiteit voor verschillende vrije vetzuren, die verschillen in de bepalingsresultaten veroorzaken. De verschillende enzymbronnen hebben verschillende substraatspecificiteit voor vrije vetzuren met verschillende c-keten lengten. Namelijk is de reactiecapaciteit verschillend. Er zijn 6 soorten FFA in menselijk serum, en slechts kunnen de enzymen met hoge specificiteit aan hen geen verschil in de meetresultaten maken.

3. wegens de invloed van CoA op de reactie, is de lineaire waaier van de gegevensresultaten smal. De kleur van FFA op de markt wordt gemeten is MEHA, TBHB, TOOS, enz., maar het wordt zeer gemengd door CoA, en het moet bovenmatig zijn, zodat wordt de interferentie die vereist. Minder chromogene stof. SCEP wordt niet gemengd door Coenzyme A maar is onstabiel. De DRUKTEN en de BOVENKANTEN zijn minder gemengd door CoA, en de BOVENKANTEN heeft een hogere maalabsorptiecoëfficiënt, zodat is het een beter chromogene stofsubstraat.

4. Voeg sulfhydryl complexe DTNB en MIT toe om het bedrag van NEM te verminderen. De sulfhydryl groep DTNM kan met de sulfhydryl groep CoA reageren om de interferentie aan chromogene stof te verwijderen. Een kleine hoeveelheid MIT kan de sulfhydryl groep CoA en ook handelingen als bewaarmiddel verwijderen. Gebaseerd op het gebruik van BOVENKANTENchromogene stof, kan de interferentie van CoA volledig worden geëlimineerd, en de stabiliteit is zeer beter.

Als u hogere eisen ten aanzien van FFA-bepalingsresultaten hebt, kunt u een betere die kwaliteitsuitrusting kiezen op de bovengenoemde punten wordt gebaseerd. Desheng produceert de grondstoffen voor FFA en andere uitrustingen van de indexbepaling. Als de BOVENKANTEN wordt gebruikt om FFA te bepalen direct, wegens de slechte stabiliteit van de oplossing, wordt het geadviseerd om een het werk oplossing voor direct gebruik v3o3or gebruik voor te bereiden.