Beschermend effect van (hydroxymethyl) tris aminomethane op DNA-bundelonderbrekingen

DNA-stralingsschade treedt meestal op twee manieren op: rechtstreeks en indirect.Het indirecte effect houdt de radiolyse van de oplossing rond DNA en de daaropvolgende interactie tussen DNA en radiolyseproducten in..

Het is daarom noodzakelijk de door hoge LET-straling veroorzaakte DNA-beschadiging te bestuderen.Dit is ook nuttig om het moleculaire mechanisme van het hoge relatieve biologische effect van hoge LET-straling te verduidelijken..

TRIS basispoeder

Bij de studie van DNA-schade veroorzaakt door ioniserende straling is het duidelijk nuttig om nauwkeurigere en betrouwbaarder experimentele resultaten te verkrijgen om het juiste DNA-oplosingssysteem te kiezen.Het meest voorkomende oplossysteem van DNA is de buffer, en zijn belangrijkste bestanddelen zijn 10 mmol/ L tris (trimethylaminomethane) en 1 mmol/ L EDTA (ethylendiamine tetraacetzuur) bij pH 8.0Laten we naar de hoofdprincipes van het onderzoek kijken.

PUC19 plasmide DNA opgelost in zuiver water, 10 mmol/lTrisbasis, 1 mmol / L geleid RA en te buffer werd bestraald door 100 keV / p.m koolstof-ionstraal (aanvankelijke energie 290 MeV / U).Het aandeel van verschillende DNA-moleculen in verschillende oplossingen werd geanalyseerd door middel van agarose-gel-elektroforese, en het gemiddelde aantal enkelstrengbrekingen (SSB) en dubbelstrengbrekingen (DSB) in elk plasmid werd bij verschillende doses berekend.

Het bleek dat Tris het plasmid-DNA aanzienlijk kan beschermen tegen koolstofzware ionbestraling door de productie van SSB en DSB te remmen.Terwijl EDTA de productie van SSB kan verbeteren en de vorming van DSB kan remmen..

Elektrophoretogram van pUC19 DNA-molecuul in verschillende oplossing en bestralingsdosis

Uit de bovenstaande figuur blijkt dat met de toename van de bestralingsdosis het percentage supergecoald DNA in het totale DNA afneemt.Het gehalte aan supergecoald DNA in Tris en te buffer daalde langzaam.Toen de dosis werd verhoogd tot 150Gy was het gehalte aan supergecoald DNA in Tris en de buffer nog steeds meer dan 80%, maar het gehalte aan supergecoald DNA in EDTA en water was minder dan 60%.De resultaten toonden aan dat het DNA in tri minder strandbreuken veroorzaakte dan in water en EDTA..

Een reeks resultaten toont aan dat Tris een duidelijk beschermend effect heeft op breukbeschadiging van DNA-strengen veroorzaakt door 100 keV/L ~ m koolstof-ionbestraling.het supergecoiled DNA bestond de hele tijd en toonde duidelijke bescherming in vergelijking met zuiver water en EDTA oplossing.