Gelijkenissen en verschillen tussen Tris en tris-HCl en tris-EDTA

Tris: trimethylol aminomethane

Trismethylaminomethane (Tris) is een organische verbinding met de formule (HOCH 2) 3CNH 2.Trisbasiswordt gebruikt om buffers voor biochemische en moleculaire biologische experimenten te bereiden.die kan condenseren met aldehiden wanneer het amino-groepen bevatBufferingskenmerken Tris is een zwakke base.1Volgens de buffertheorie is het effectieve buffertekort van Tris buffer tussen pH 7,0 en 9.2.

De pH van de waterige oplossing van Trisbasis is ongeveer 10.5In het algemeen wordt zoutzuur toegevoegd om de pH-waarde aan te passen aan de gewenste waarde, en dan kan de bufferoplossing met deze pH-waarde worden verkregen.de invloed van de temperatuur op de pKa van Tris moet worden beheerd.

Aangezien Tris buffer een zwakke alkalische oplossing is, zal DNA in een dergelijke oplossing worden ontprotoneerd, waardoor de oplosbaarheid wordt verbeterd.Mensen voegen EDTA vaak toe aan Tris zoutzuur buffer om "TE buffer" te makenAls de pH-gecorrigeerde zuuroplossing wordt vervangen door azijnzuur, dan wordt "TAE-buffer" (Tris/Acetate/EDTA) verkregen.en indien het wordt vervangen door boorzuurDeze twee buffers worden gebruikt in nucleïnezuur elektroforese experimenten.

1 M Tris-HCl (pH7).4, 7.6, 8.0)

Componentconcentratie 1M Tris-HCl

Voorbereidingsvolume 1L

Voorbereidingsmethode:

1Weeg 121,1 gram Tris in een 1 liter beker.

2. Voeg ongeveer 800 ml gedeïoniseerd water toe en roer om op te lossen.

3Voeg de hoeveelheid geconcentreerde HCl toe zoals weergegeven in de onderstaande tabel om de vereiste pH-waarde aan te passen.

pH Geconcentreerde HCl

7.4 ongeveer 70 ml

7.6 ongeveer 60 ml

8.0 ongeveer 42 ml

4Breng de oplossing tot 1 L.

5Na sterilisatie bij hoge temperatuur en hoge druk op kamertemperatuur bewaren.

Opmerking: Laat de oplossing tot kamertemperatuur afkoelen voordat de pH-waarde wordt aangepast, omdat de pH-waarde van de Tris-oplossing sterk varieert met de temperatuur.Wanneer de temperatuur met 1°C stijgt, daalt de pH-waarde van de oplossing met ongeveer 0,03 eenheden.

1.5 M Tris-HCl (pH8.8)

Componentconcentratie 1,5 M Tris-HCl

Voorbereidingsvolume 1L

Voorbereidingsmethode

1Weeg 181,7 gram Tris in een 1 liter beker.

2. Voeg ongeveer 800 ml gedeïoniseerd water toe en roer om op te lossen.

3Pas de pH aan op 8,8 met geconcentreerde HCl.

4Breng de oplossing tot 1 L.

5Na sterilisatie bij hoge temperatuur en hoge druk op kamertemperatuur bewaren.

Opmerking: de oplossing moet worden afgekoeld tot kamertemperatuur voordat de pH-waarde wordt aangepast, omdat de pH-waarde van de Tris-oplossing sterk varieert met de temperatuur,

Voor elke temperatuurverhoging van 1 °C neemt de pH van de oplossing met ongeveer 0,03 eenheden af.

De voordelen van Tris-HCl buffer zijn:

1Omdat de Trisbasis meer alkalisch is, kan dit buffersysteem worden gebruikt om een bufferoplossing met een breed pH-bereik van zuur tot alkalisch te bereiden;

2 Kleine interferentie met biochemische processen, geen neerslag met calcium, magnesium ionen en zware metalen ionen.

De nadelen zijn:

1 De pH-waarde van de bufferoplossing wordt sterk beïnvloed door de concentratie van de oplossing, de bufferoplossing wordt tien keer verdund en de verandering van de pH-waarde is groter dan 0.1;

2Het temperatuureffect is groot en de temperatuurverandering heeft een grote invloed op de pH-waarde van de bufferoplossing, namelijk: △pKa/°C=-0.031, bijvoorbeeld: de pH van de bufferoplossing bij 4°C=8.4, dan is de pH-waarde bij 37°C= 7.4, moet het dus worden bereid bij de gebruikstemperatuur, kan de bij kamertemperatuur bereide Tris-HCl-buffer niet worden gebruikt bij 0 °C ~ 4 °C.

3 CO2 in de lucht wordt gemakkelijk opgenomen, dus de voorbereide buffer moet goed afgesloten zijn.

Deze bufferoplossing zal bepaalde pH-elektroden verstoren, dus gebruik een elektrode die compatibel is met de Tris-oplossing.

Tris-oplossing kan kooldioxide uit de lucht absorberen, let op het afdichten tijdens de opslag, als u steriliteit nodig heeft, kunt u natriumazide toevoegen.

TE is Tris-EDTA buffer (10mM Tris, 1mM EDTA, pH7,4 pH7,6 pH8,0).

Meestal gebruikte moleculaire biologische reagentia voor DNA-ontbinding.

Bereid 10×TE Buffer (pH7) voor.4, 7.6, 8.0)

Componentconcentratie: 100mM Tris-HCl, 10mM EDTA

Voorbereidingsvolume: 1L

Voorbereidingsmethode:

1De volgende oplossing wordt gemeten en in een 1l-beker geplaatst.

1M Tris-HCl buffer (pH7).4, 7.6, 8.0) 100 ml

500 mM EDTA (pH8.0) 20 ml

2. Voeg ongeveer 800 ml gedeïoniseerd water toe aan de beker en meng gelijkmatig.

3Na het instellen van het volume op 1 L, steriliseren bij hoge temperatuur en hoge druk.

4Bewaar bij kamertemperatuur.