Bericht versturen
Wuhan Desheng Biochemical Technology Co., Ltd
Wuhan Desheng Biochemical Technology Co., Ltd
nieuws
Thuis / nieuws /

Bedrijfsnieuws Over Wat is de juiste pH-waarde voor HEPES om 293T-cellen te kweken?

Wat is de juiste pH-waarde voor HEPES om 293T-cellen te kweken?

2024-07-03
Wat is de juiste pH-waarde voor HEPES om 293T-cellen te kweken?

In celbiologie en moleculair biologisch onderzoek, 293T cellen, als een getransformeerde menselijke embryonale niercellijn,zijn uitgegroeid tot een populair model systeem in wetenschappelijk onderzoek vanwege hun gemakkelijke transfectie en goede expressie van exogene genenOm ervoor te zorgen dat deze cellen gezond kunnen groeien en hun biologische kenmerken behouden, is een nauwkeurige controle van de kweekomstandigheden van cruciaal belang, waarbij de pH-stabiliteit een van de fundamenten is.HEPES-buffer(4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazineethanesulfonsuur) speelt een onvervangbare rol als een goede buffer bij het handhaven van de pH-stabiliteit in celcultuurmedium.In dit artikel wordt ingegaan op het juiste pH-bereik van HEPES en de toepassingsstrategieën in celcultuur bij het kweken van 293T-cellen..

 

De rol en het belang van HEPES


HEPES is een uitstekend organisch buffermiddel dat de pH-stabiliteit van oplossingen in een breed pH-bereik (meestal 6,8 tot 8,2) kan handhaven.Het interfereert niet met de meeste biochemische reacties en vormt geen stabiele complexen met metaalionenVoor 293T-cellen helpt de toevoeging van HEPES de pH-schommelingen veroorzaakt door metabole activiteit te verminderen.ervoor te zorgen dat de cellen in een geschikte groeimedia staan.


Ideale pH-omgeving voor 293T-cellen


Hoewel HEPES zelf een grote buffercapaciteit heeft, moet bij de pH-instelling van het kweekmedium voor 293T-cellen nog steeds rekening worden gehouden met de fysiologische voorkeuren van de cellen.Onderzoek heeft aangetoond dat de cellijn 293 (waaronder 293T) een licht zure omgeving de voorkeur geeft.In de praktijk kan HEPES echter, gezien het buffereffect van HEPES en de universaliteit van celcultuurmedium, de celgroei en de celgroei bevorderen.het wordt in het algemeen aanbevolen de pH-waarde van het kweekmedium tussen 7.0 en 7.2Dit voldoet niet alleen aan de voorkeur van de cellen voor een licht zure omgeving, maar zorgt ook voor de effectiviteit van het HEPES-buffersysteem.het voorkomen van celgroeiverhindering of morfologische afwijkingen veroorzaakt door alkaliteit.


Aanpassingsstrategieën in de praktijk


1De hoeveelheid toegevoegde HEPES:het toevoegen van een passende hoeveelheid HEPES kan de zure stoffen die door het celmetabolisme worden geproduceerd tijdens de celcultuur effectief bufferen en de pH-stabiliteit handhaven.


2Het gebruik van NaHCO3 om de pH aan te passen: Hoewel HEPES het belangrijkste buffercomponent is, is de toevoeging van NaHCO3 aan het kweekmedium ook noodzakelijk om de pH-waarde voorlopig aan te passen aan het streefbereik.Er zij op gewezen dat de zuiverheids- en fabrikantverschillen van NaHCO3 uit verschillende partijen tot lichte veranderingen in de pH-waarde kunnen leiden.Daarom moet bij het gebruik van een nieuwe partij NaHCO3 een pH-meter worden gekalibreerd om ervoor te zorgen dat de pH van het kweekmedium tussen de 7 en 7 valt.2.


3. Regelmatige controle en aanpassing: Tijdens het celcultuurproces moet de pH-waarde van het kweekmedium regelmatig worden gecontroleerd en indien nodig worden verfijnd.Hoewel HEPES een sterke bufferactiviteit biedt, langdurige celcultuur of celcultuur met een hoge dichtheid kan leiden tot geleidelijke pH-verschuiving.Het is essentieel om een goede cultuurtoestand te behouden door tijdig vervanging van vers kweekmedium of passende toevoeging van HEPES-buffer..


4- Persoonlijke aanpassing: de experimentele omstandigheden in verschillende laboratoria (zoals kooldioxideconcentratie, temperatuur, enz.)Het aantal celpassages kan de gevoeligheid van cellen voor pH beïnvloeden., is het dus van essentieel belang om persoonlijke aanpassingen aan te brengen naargelang de werkelijke situatie, met inachtneming van de basisbeginselen.

 

Samengevat is het begrijpen en beheersen van het juiste pH-bereik van HEPES een fundamentele en belangrijke stap in het voeden van 293T-cellen.in combinatie met regelmatige monitoring en aanpassing, kan voor 293T-cellen een groeiomgeving worden gecreëerd die dicht bij de ideale toestand ligt, waardoor de betrouwbaarheid van het experiment wordt verbeterd en de reproduceerbaarheid wordt verminderd.Celcultuur is zowel wetenschap als kunst.De resultaten van de experimenten kunnen vaak aanzienlijk verbeterd worden.biologische bufferacties, Desheng kan grondstoffen leveren met 99% zuiverheid voor fabrikanten om voor te bereiden en te gebruiken, wat handig, eenvoudig en heeft een stabiele buffering prestaties.Voel je vrij om details te vragen.!