U zou deze kennis over varkenstrypsine moeten kennen

Wat trypsine is

De trypsine (C6H15O12P3) is een soort protease. In gewervelde dieren, functioneert het als spijsverteringsenzym. In de alvleesklier, is het samengesteld als voorloper van het trypsinogen enzym. Het wordt afgescheiden als component van alvleesklier- sap en in geactiveerde trypsine onder de beperking van enterokinase of trypsine ontbonden. Het is endopeptidase die de carboxyl kant van lysine en arginine residu's in de polypeptideketting kan snijden. Het niet alleen functioneert als spijsverteringsenzym, maar ook beperkt de decompositie van voorlopers van andere enzymen zoals chymotrypsinogen, carboxypeptidase, en phospholipase, en heeft een activerend effect. Het is de meest specifieke protease, en het is een onontbeerlijk hulpmiddel in het bepalen van de aminozuuropeenvolging van een proteïne geworden.

Inleiding van varkenstrypsine

De relatieve moleculaire massa van varkens trypsinogen is ongeveer 24 000. Volgens het verschil in isoelectric punt, varkens kan trypsinogen in anionisch worden verdeeld (pl6.8<6>). Omdat het type van kationen niet alleen een groter soortelijk gewicht, heeft maar ook betere stabiliteit dan het anionische type heeft, varkens werd trypsinogen van kationen geselecteerd voor bouw en uitdrukking. Varkens trypsinogen bevat 12 cysteines, die 6 paren bisulfidebanden (30-160, 48-64, 132-233, 139-206, 171-185, 196-220) kunnen vormen, die zeer de moeilijkheid van denaturatie en renaturation van opnemingsorganismen in verdere experimenten verhoogden.

Toepassing van varkenstrypsine

De varkenstrypsine is een soort trypsine, dat als additief voor de verwijdering van oppervlakte adherente cellen, de productie van de vaccins van het griepvirus, insuline en andere proteïnen, snelle hydrolyse van proteïnen, en de voorbehandeling van dierlijke cellen en weefsels kan worden gebruikt. Er is een grote vraag naar trypsine met hoge zuiverheid en sterke activiteit. Momenteel, is een voorbereidingsproces van recombinante varkens trypsinogen gevestigd, en de verkregen recombinante varkenstrypsine heeft goede enzymactiviteit en bevat andere dierlijke bronverontreiniging niet, die een bepaalde experimentele basis voor geïndustrialiseerde onderzoek en productie vormt.

Kenmerken van varkenstrypsine

De varkenstrypsine is onstabiel en naar voren gebogen van aard aan autolyse. Wanneer het construeren van een recombinant varkens trypsinogen uitdrukkingssysteem, deze autolyseeigenschap het voor het eukaryotic uitdrukkingssysteem moeilijk maakt om volledige trypsinogen te verkrijgen, en het geactiveerde product zal de gastheer beïnvloeden. De cellen kunnen ook giftig zijn, zo nadenken kiezend een prokaryotic uitdrukkingssysteem. Bovendien vereisen de autolysekenmerken dat de activeringsvoorwaarden van varkens trypsinogen ook strikt moeten worden gecontroleerd.

Voorbereidingsmethode van varkenstrypsine

In de traditionele voorbereidingsmethode, zijn er vele scheiding en reinigingsstappen en oud, die gemakkelijk is om schade aan de proteïne te veroorzaken en inactivering te veroorzaken. Het resulteren in lage opbrengst. Daarom zijn de voorbereiding en de productie van varkenstrypsine geleidelijk aan van extractie van dierlijke alvleesklier naar recombinante uitdrukkingsproductie verschoven. De productie van trypsine door een recombinant varkens trypsinogen-afgeleid Escherichia coli-uitdrukkingssysteem te construeren kan het risico van verwante ziekteverwekkerverontreiniging en het risico ook vermijden om onbekende virussen te dragen toe te schrijven aan de dierlijke oorsprong van de donor.