Toepassing van de biologische buffer HEPES 7365-45-9 in de lactaatdehydrogenase detectie kit

Als een belangrijke indicator in klinische diagnose en biologisch onderzoek beïnvloeden de stabiliteit en nauwkeurigheid van lactaatdehydrogenase (LDH) detectiekits direct de betrouwbaarheid van experimentele resultaten. Van de verschillende componenten van de reagenskit is de biologische buffer 4-hydroxyethylpiperazine-ethaansulfonzuur (HEPES-buffer) een kernelement geworden bij het handhaven van pH-stabiliteit in de detectieomgeving dankzij zijn unieke fysisch-chemische eigenschappen.

hepes poeder

1. Lage adsorptie: De oppervlakte-inertie kan de niet-specifieke adsorptie van biomoleculen zoals eiwitten en enzymen verminderen, waardoor experimentele fouten worden voorkomen;

2. Temperatuurstabiliteit: niet gemakkelijk ontleed bij conventionele laboratoriumtemperaturen, geschikt voor langdurige experimenten en monsterbewaring;

3. Biocompatibiliteit: Het is niet giftig voor cellen, heeft geen invloed op de enzymactiviteit of het celmetabolisme en voldoet aan de veiligheidseisen van biologische tests.

Bij LDH-detectie moet de reagenskit de intracellulaire omgeving in vitro simuleren. De bovenstaande kenmerken van HEPES kunnen de pH-stabiliteit van het reactiesysteem garanderen, waardoor enzymactiviteitsvervorming of monsterdegradatie veroorzaakt door pH-schommelingen wordt voorkomen.

Het mechanisme van HEPES in LDH-detectiekits

Het kernprincipe van LDH-detectie is het reduceren van NAD+ tot NADH door enzymatische reactie, die reageert met chromogene reagentia (zoals INT) om meetbare formaldehydeproducten te genereren. Tijdens dit proces kunnen kleine veranderingen in pH de enzymactiviteit, de bindingssnelheid van het substraat en de kleurreactiesnelheid direct beïnvloeden. HEPES zorgt voor de nauwkeurigheid van de detectie door de volgende mechanismen:

1. pH-stabiliteit: In het reactiesysteem van de reagenskit kan HEPES-buffer de waterstofionen of hydroxide-ionen neutraliseren die tijdens het reactieproces worden gegenereerd, een constante pH handhaven en ervoor zorgen dat de enzymatische reactie onder optimale omstandigheden verloopt;

2. Anti-interferentie: De lage ionsterkte kan de interferentie van onzuiverheden (zoals zouten en eiwitten) in het monster op de reactie verminderen en de detectiegevoeligheid en -specificiteit verbeteren;

3. Verlengde houdbaarheid: Tijdens de opslagfase van de reagenskit kan HEPES enzym- of kleurreagensinactivering veroorzaakt door pH-drift voorkomen en de geldigheidsduur van het reagens verlengen.

Als voorbeeld van een lactaatdehydrogenase-cytotoxiciteitsdetectiekit, omvat het reactiesysteem HEPES-buffer, lactaatsubstraat, NAD+ en kleurreagens. Tijdens het detectieproces kan HEPES-buffer (pH 7,5) de enzymatische reactieomgeving stabiel handhaven, waardoor een lineair verband wordt gewaarborgd tussen de generatiesnelheid van NADH en de kleurintensiteit van formaldehydeproducten, waardoor de LDH-activiteit nauwkeurig kan worden gekwantificeerd met behulp van colorimetrische methoden.

Productverpakking

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. is gespecialiseerd in de productie van hoogwaardige

biologische bufferstoffen

zoals Hepes. Sinds de oprichting heeft Desheng zich toegelegd op het onderzoek en de productie van in-vitro diagnostische reagentia en heeft het een rijke productie-ervaring. Ons professionele technische team garandeert niet alleen de productkwaliteit, maar biedt ook oplossingen op maat en tijdige oplossing van after-sales problemen. Als u geïnteresseerd bent in onze producten, klik dan op de officiële website voor meer details of neem contact met mij op!