Specifieke toepassing van biologische buffer BES 10191-18-1 bij eiwitkristallisatie

Op het gebied van biochemie en structurele biologie is het kristalliseren van eiwitten een cruciale stap om de driedimensionale structuur te ontcijferen en de functionele mechanismen te onthullen.het eiwitkristallisatieproces is zeer gevoelig voor milieufactorenIn dit verband wordt N, N-bis (2-hydroxyethyl) -2-amino-ethanesulfonsyre (BES-buffer), als een efficiënte biologische buffer, is door zijn unieke chemische eigenschappen en biocompatibiliteit een "verborgen drijvende kracht" geworden in het onderzoek naar eiwitkristallisatie.

De chemische eigenschappen van BES: een precieze regulator van een stabiele pH

BES is een zwitterionisch buffermiddel, waarvan de moleculaire structuur amino (basisgroep) en sulfozuur (zuurgroep) groepen bevat.Het kan dynamisch de zuurgraad en alkaliteit van een oplossing in evenwicht brengen door middel van protonatie- en deprotonatie-reacties binnen een specifiek pH-bereikHet effectieve bufferbereik van BES is pH 6,1-7.5, die het iso-elektrische punt (pI) en de fysiologische omgeving van de meeste eiwitten nauwkeurig bestrijkt, waardoor het de voorkeursbuffer is onder neutrale omstandigheden.4) is ongevoelig voor temperatuursveranderingen en kan zelfs onder lage-temperatuurkristalliseringsomstandigheden een stabiel buffervermogen behouden, waardoor pH-verschuivingen veroorzaakt door temperatuurschommelingen worden vermeden en een betrouwbare milieucontrole voor de eiwitkristallisatie wordt geboden.

BES-poeder

Belangrijkste voordelen van BES bij eiwitkristallisatie

1De moleculaire structuur van BES met uitstekende biocompatibiliteit is vergelijkbaar met die van natuurlijke aminozuren en heeft bij fysiologische concentraties geen remmend effect op de eiwitactiviteit.In vergelijking met andere buffermiddelen zoals Tris of fosfaat, ondergaat BES geen niet-specifieke binding aan geladen groepen op het eiwitoppervlak, waardoor de natuurlijke conformatie van het eiwit of de vorming van kristallenkernen niet wordt verstoord.

2De eiwitkristallisatie die is ontworpen met een lage ionensterkte is extreem gevoelig voor ionensterkte.en hoge of lage zoutconcentraties kunnen leiden tot amorfe neerslag of onvermogen om kristallenkernen te laten groeienAls een niet-ionisch buffermiddel, BES does not introduce additional ions and can be flexibly combined with salt solutions (such as ammonium sulfate and polyethylene glycol) to precisely regulate the ion environment in crystallization conditions and improve the success rate of crystallization.

3. BES heeft een sterke chemische stabiliteit en is niet gemakkelijkontbindt onder licht, oxidatie of lange opslagomstandigheden en vormt geen complexen met metalen ionen zoals Mg 2+ en Ca 2+.Deze eigenschap maakt het geschikt voor kristallisatiesystemen die een langdurige incubatie of complexe componenten zoals membraanproteïnen vereisen, waarbij de reproduceerbaarheid van de proefomstandigheden wordt gewaarborgd.

Analyse van de drie belangrijkste toepassingsscenario's van BES

1De "bewaker" van de kristallisatie van membraanproteïnen is uiterst moeilijk te kristalliseren vanwege het hoge aandeel van hydrofobische gebieden in membraanproteïnen.BES kan de aggregatietendentie van membraanproteïnen in oplossing verminderen door een neutrale pH-omgeving te handhaven, en zijn lage ioninterferentie eigenschappen zijn zeer compatibel met wasmiddelen (zoals DDM), waardoor een stabiele ondersteuning voor de vorming van geordende rooster van membraan eiwitten.

2Bij lage temperatuurkristallisatie worden stabilizers gebruikt om de afbraak van eiwitten te vertragen en de langzame kristallisatie te bevorderen.De pKa van BES is laag temperatuurafhankelijk en kan de pH bij lage temperaturen effectief buffer, waardoor het probleem van verminderde buffercapaciteit als gevolg van temperatuurverlaging in traditionele buffers wordt vermeden en de herhaalbaarheid van laagtemperatuurkristallisatie aanzienlijk wordt verbeterd.

Verpakking van het product

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd. is een hoogwaardige fabrikant gespecialiseerd in de productie vanbiologische bufferactiesHet heeft geavanceerde apparatuur en uitstekend technisch personeel om de kwaliteit van het product te waarborgen, goede op maat gemaakte diensten en naverkoopdiensten te verlenen.Als u recent behoefte heeft aan biologische buffermiddelen, klik op de officiële website van Desheng voor meer details!