CAS 1135-40-6 CAPS Cyclohexylamine Propanesulfonsyre voor bufferingsexperimenten

Korte inleiding

Vanuit het oogpunt van de moleculaire structuur is CAPS een cyclohexane N-gesubstitueerd sulfaatzuur met een moleculair gewicht van 221,32 en amfoterisch.Het is een zeer goede biologische buffer met een pH bufferbereik van 9.7-11.1Het wordt meestal gebruikt voor WB-experimenten. Buffer voor eiwit PVDF-transfermembraan of nitrocellulose NC-transfermembraan.

CAPS-buffer

WB staat voor Western Blot Protein Immunoblotting Experiment.en de expressie van specifieke eiwitten in de geanalyseerde cellen of weefsels verkrijgen door de positie en diepte van de kleur te analyserenDe experimentele notities zijn als volgt:

1. SDS-PAGE-elektrophoresis: vergelijkbaar met de methode van nucleïnezuurhybridisatie, behalve dat het gedetecteerde eiwit, de sonde het antilichaam is en het gekleurde secundaire antilichaam wordt gelabeld.Over het algemeen, Tri-glycerine of Tris-tricine buffer systeem wordt gebruikt voor eiwitten met een laag moleculair gewicht, en CAPS buffer systeem is beter voor eiwitten met een hoog moleculair gewicht.Glycine in de buffer beïnvloedt de sequentie., dus de transferbuffer die wordt gebruikt voor sequencing is 10mM/1CAPS10% methanol.een buffer met een hoge methanolconcentratie heeft een goed transfereffect op eiwitten met een laag moleculair gewicht, terwijl een buffer met een lage methanolconcentratie of zelfs geen methanol goed is voor eiwitten met een hoog moleculair gewicht.

2. Wanneer het PVDF-membraan is verwerkt, wordt het een paar seconden in methanol gedrenkt en vervolgens in een CAPS-buffer voor elektrische afdrukken geplaatst.Als het PVDF-membraan droog wordtDe elektroforese gel moet ook worden geweekt in CAPS buffer voor 5-10 minuten.

3De overdrachtsomstandigheden zijn meestal 50 V constante spanning, 100-170 mA stroomintensiteit en overdracht van elektrische afdrukken bij kamertemperatuur..Voor eiwitten met een hoger moleculair gewicht moet de overdrachtstijd worden verlengd.

Verpakking van het product

4. Voordat het wordt geverfd, moet het PVDF-membraan worden verwijderd en gespoeld met gedeïoniseerd water, in methanol worden geweekt, vervolgens gedurende 30-50 seconden met 0,1% Coomassie briljantblauw worden geverfd, met 50% methanol verkleurd,gewassen met gedeïoniseerd water en gedroogd.

Bovenstaande introductie van enkele zaken die aandacht nodig hebben in het eiwit imprinting experiment.draag laboratoriumkleding en draag wegwerphandschoenen voor de operatieDe CAPS-buffer voor elektrische afdrukken wordt aanbevolen te worden vervaardigd door: DeshengDe configuratie van hoogwaardig cyclohexylamine propanesulfoninezuur.