Van de Bufferoplossingenpijpen van CAS 5625-37-6 het Goede Zuur van piperazine-1,4-Diethanesulfonic

De volledige naam van PIPES-buffer is piperazine-1,4-diethanesulfonsuur, een stof die de pH van de oplossing binnen een bepaald bereik kan houden.Wanneer een bepaalde hoeveelheid zuur en alkalie aan sommige oplossingen wordt toegevoegd, heeft het het effect de pH-wijziging van de oplossing te belemmeren, wat een buffering wordt genoemdbiologische bufferEen dergelijke oplossing wordt een bufferoplossing genoemd. PIPES is een belangrijk onderdeel van de buffer van Goods.die niet aan biochemische processen deelneemt en deze niet verstoort.
 
Basisinformatie
 

 
Toepassing van PIPES
 
Het kan geen stabiele complexen vormen met de meeste metalen ionen en is geschikt voor buffer in oplossingssystemen die metalen ionen bevatten.Het werd toegepast bij de zuivering van tubuline met behulp van cellulosefosfaatchromatografieDe gezuiverde recombinante GTP-bindende eiwitten ARF1 en ARF2 werden door gelfiltratie gezuiverd en gebruikt als buffer om keto-enzym uit E. coli te kristalliseren.omdat PIPES vrije radicalen kan vormen, is niet geschikt voor redox-systeem.Bij katieenuitwisselingschromatografie moet een lage concentratie van PIPES-bufferoplossing worden gebruikt, omdat PIPES een relatief hoge ionensterkte heeft en de pKa-waarde afhankelijk is van de concentratie..
 

PIPES-buffer
 
Voordeel van PIPES
 
De zuiverheid (> 99%) is oplosbaar in water, het proces is stabiel en het uiterlijk van het product kan worden gegarandeerd als puur wit kristalpoeder.
 
Piperazine-diethanesulfonsuur PIPES heeft een verscheidenheid aan buffersystemen.waaronder de bufferoplossing Transformation Buffer (ook wel TB-oplossing genoemd) kan worden gebruikt om zeer efficiënte bevoegde cellen voor te bereiden.
Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellSommige bacteriën zijn van nature bekwaam, zoals Bacillus subtilis, en sommige zijn kunstmatig bekwaam, zoals Escherichia coli.Het behandelen van de recipiëntcellen met een speciale methode kan de doorlaatbaarheid van het celmembraan veranderen, waardoor het een competente cel is die dragermoleculen met vreemd DNA door laat gaan.
Voorbereiding van transformatiebuffer:
 

Voor de transformatie van bekwame bacteriële cellen wordt gebruik gemaakt van de calciumchloride methode.37 graden's nachts tot een enkele kolonie groeit.Kies een kolonie met een diameter van 1-3 mm om het SOB-medium te inoculeren in een 250 ml/3L Erlenmeyer-kolf of 80 ml/1L Erlenmeyer-kolf.Stop de cultuur als de OD600 ongeveer 0 is..4-0.8, koelen in 4 graden ijswater gedurende 10 minuten, centrifugeer bij 300 RPM gedurende 15 minuten, herstellen van de bacteriën na het verwijderen van de supernatant, suspendeer in 1/3 volume van ijskoud TB oplossing,en centrifugeer opnieuw gedurende 10 minuten om de bacteriën te herstellenSuspendeer met 1/12,5 volume TB, voeg DMSO toe met een eindconcentratie van 7%, koel vervolgens 10 minuten in aliquota van 0,1-1 ml en bewaar rechtstreeks in vloeibare stikstof of bij -80°C.
 

Verpakking van het product
In de TB-oplossing van gesuspendeerde Escherichia coli omvatten de belangrijkste componenten buffer PIPES en calciumchloride om cellen te transformeren in bevoegde cellen.Opgemerkt zij dat deze methode geschikt is voor E. coli stammen die geen plasmiden bevatten en niet geschikt zijn voor grote plasmiden.de optimale OD600 van verschillende bacteriestammen is ook anders, en moet worden aangepast volgens verschillende experimenten.
Er zijn veel methoden om bevoegde cellen voor tuberculose te bereiden, en de efficiëntie van verschillende methoden kan verschillen, en de toepasselijke stammen of celsoorten kunnen ook verschillen.PIPES-bufferDe door Desheng geproduceerde stof is een reactief in poedervorm en er kunnen op verschillende behoeften geschikte TB-oplossingen worden bereid.