Van de Bufferoplossingenpijpen van CAS 5625-37-6 het Goede Zuur van piperazine-1,4-Diethanesulfonic

Goed Zuur cas5625-37-6 Wit kristalpoeder Purity>99% van piperazine-1,4-Diethanesulfonic van Bufferoplossingenpijpen

Sleutelwoorden: Goede s-buffer, PIJPEN, piperazine-1,4-diethanesulfonic zuur

De volledige naam van PIJPEN is piperazine-1,4-diethanesulfonic zuur, een substantie die pH van de oplossing binnen een bepaalde waaier kan handhaven. Wanneer een bepaalde hoeveelheid zuur en alkali aan sommige oplossingen wordt toegevoegd, heeft het het effect van het belemmeren van de pH verandering van de oplossing, die een als buffer optredende voor biologische buffer wordt genoemd. Zulk een oplossing wordt genoemd een bufferoplossing. De PIJPEN is een belangrijk lid van Goede s-buffer. De goede s-buffer is een buffersysteem toepassingsgericht aan het onderzoek van de het levenswetenschap, dat niet binnen deelneemt en zich niet in biochemische processen mengt.

Basisinformatie

Moleculaire Structuur

Toepassing van PIJPEN

Het kan geen stabiele complexen met de meeste metaalionen vormen en is geschikt voor buffer in oplossingssysteem die metaalionen bevatten. Het werd toegepast op de reiniging van tubulin door de chromatografie van het cellulosefosfaat te gebruiken. Gezuiverde recombinante GTP eiwitarf1 binden en ARF2 die werden gezuiverd door gelfiltratie en werden gebruikt als buffer om ketoenzyme van E. coli te kristalliseren. Bovendien omdat de PIJPEN vrije basissen kunnen vormen, is het niet geschikt voor redoxsysteem. De lage concentratie van PIJPENbufferoplossing in de chromatografie van de kationenuitwisseling moeten zou worden gebruikt omdat de PIJPEN vrij hoge Ionische sterkte heeft en zijn pKawaarde afhankelijk van de concentratie is.

Voordeel van PIJPEN

De zuiverheid (> 99%) is in water oplosbaar, is het proces stabiel, en de verschijning van het product kan worden gewaarborgd om zuiver wit kristalpoeder te zijn.

Piperazine heeft de diethanesulfonic zure PIJPEN een verscheidenheid van buffersystemen, waaronder de Buffer van de bufferoplossingstransformatie (ook genoemd TB oplossing) kan worden gebruikt om hoogst efficiënte bekwame cellen voor te bereiden.

De bekwame staat verwijst naar een speciale fysiologische staat waarin de cellen (of de bacteriën) DNA-molecules van het omringende milieu kunnen opnemen en niet door beperkingsendonucleases in de cel gemakkelijk opgesplitst. Sommige bacteriën zijn natuurlijk bekwaam, zoals Bacil - subtilis, en wat zijn kunstmatig bekwaam, zoals Escherichia coli. Het behandelen van de begunstigde cellen met een speciale methode kan de doordringbaarheid van het celmembraan veranderen, die tot het maken een bekwame cel die dragermolecules met buitenlandse DNA om toestaat over te gaan door.

Het bekwame TB poeder van oplossings ruwe materieel-pijpen

De voorbereiding van de transformatiebuffer:

De transformatie van bekwame bacteriële cellen gebruikt de methode van het calciumchloride. E. die coli in vloeibare stikstof of ijskast bij lage temperatuur, strook op pond-plaat wordt genomen, 37 graden 's nachts tot één enkele kolonie groeit. Pluk een kolonie met een diameter van 13mm om het SOB middel in een fles van 250ml/3L Erlenmeyer of de fles van 80ml/1L in te enten Erlenmeyer. Broed bij 18 graden uit bij 150-250RPM voor 19-50h. Houd de cultuur tegen wanneer OD600 ongeveer 0.4-0.8 is, koel in 4 graden ijswater 10 minuten, centrifugeer bij 300 t/min 15 minuten, krijg de bacteriën na het verwijderen van de bovendrijvende substantie terug, schort in 1/3 volume van ijskoude TB oplossing op, en centrifugeer opnieuw 10 minuten om de bacteriën terug te krijgen. Schort met volume 1/12.5 van TB op, voeg DMSO met een definitieve concentratie van 7% toe, en koel dan 10 minuten in 0.1-1ml-gedeelten, en sla direct in vloeibare stikstof of -80°C. op.

In de TB oplossing van opgeschorte Escherichia coli, omvatten de belangrijkste onderdelen bufferpijpen en calciumchloride om cellen in bekwaam om te zetten. Men zou moeten opmerken dat deze methode geschikt voor de spanningen van E. coli die geen plasmiden bevatten, is en niet geschikt voor grote plasmiden is. De transformatieefficiency kan na cryopreservation worden verminderd. Bovendien is optimale OD600 van verschillende bacteriële spanningen ook verschillend, en moet volgens verschillende experimenten worden aangepast.

Er zijn vele methodes om bekwame cellen met TB voor te bereiden, en de efficiency van andere methoden kan verschillend zijn, en de toepasselijke spanningen of de celtypes kunnen ook verschillend zijn. De PIJPEN door Desheng worden geproduceerd is een poederreagens, en de bekwame TB oplossingen kunnen volgens verschillende behoeften worden voorbereid die.