Toepassing van biologische buffer CAPS 1135-40-6 in PCR-diagnostische kit

De chemische eigenschappen van CAPS: het "gouden evenwichtspunt" voor zwakke base-buffering

CAPS is een zwitterionische buffer met een pKa-waarde van 10,4 (25 ℃), die uitstekende buffercapaciteit vertoont in alkalische omgevingen. Vergeleken met traditionele buffermiddelen zoals Tris of HEPES, sluit het bufferbereik van CAPS (pH 9,7-11,0) beter aan bij de vereisten van bepaalde speciale systemen in PCR-reacties. De cyclohexylaminegroep in de moleculaire structuur van CAPS-buffer geeft het een goede hydrofobiciteit, terwijl de sulfonzure groep de wateroplosbaarheid garandeert. Deze "flexibele en rigide" eigenschap stelt CAPS in staat om de pH-stabiliteit van de oplossing te handhaven en tegelijkertijd niet-specifieke interferentie met de enzymactiviteit te verminderen, wat een milde en stabiele omgeving biedt voor PCR-reacties.

CAPS-poeder

De kernrol van CAPS in PCR

1. pH-stabiliteit garandeert enzymactiviteit: CAPS reguleert de pH-waarde van het reactiesysteem nauwkeurig om pH-afwijkingen te voorkomen die worden veroorzaakt door verdamping van de oplossing of chemische afbraak tijdens denaturatiestappen bij hoge temperaturen, waardoor ervoor wordt gezorgd dat het enzym DNA-synthese katalyseert onder optimale omstandigheden en de amplificatie-efficiëntie aanzienlijk wordt verbeterd.

2. Remming van niet-specifieke binding en verbetering van de specificiteit: CAPS handhaaft een stabiele ionensterkte, vermindert de kans op mismatch van primer-template en de unieke chemische structuur kan de oppervlaktespanning van de oplossing verminderen, de druppelvorming optimaliseren en de achtergrondruis in hoogprecisiedetectie zoals PCR verder verminderen.

3. Compatibel met complexe monsters en verbeterde anti-interferentiecapaciteit: Klinische monsters (zoals bloed en speeksel) bevatten vaak remmers die PCR-reacties kunnen verstoren. Het buffersysteem van CAPS kan het ladings effect van sommige remmers neutraliseren, in combinatie met het denaturatie-effect van de alkalische omgeving op bepaalde eiwitremmers, waardoor de aanpassingsvermogen van de kit aan complexe monsters aanzienlijk wordt verbeterd.

Praktische toepassingsgevallen van CAPS: uitgebreide validatie van laboratorium tot klinische omgevingen

Bij de nucleïnezuurdetectie van COVID-19 is CAPS opgenomen in de PCR-kitformule door verschillende gezaghebbende organisaties. Zo vertoonde de reagenskit van een bepaald merk met behulp van het CAPS-buffersysteem een hogere gevoeligheid in vergelijkende tests en was in staat om de pH-stabiliteit te handhaven onder hoge temperatuuromstandigheden, waardoor valse negatieve resultaten werden verminderd. Bovendien kan in scenario's zoals de detectie van genetische ziekte mutaties en tumor merker analyse, de zwak alkalische omgeving van CAPS de efficiëntie van de probebinding optimaliseren, de fluorescentiesignaalintensiteit verhogen en ondersteuning bieden voor de detectie van targets met lage abundantie.

Productverpakking